La tinción de Gram - Microamaze

Química Admin Diciembre 19, 2016 0 7
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Hola a todos,

Hoy voy a escribir sobre una de las técnicas importantes que se utilizan en Laboratorio de Microbiología todos los días. a saber, tinción de Gram

La tinción de Gram es común, importante y técnicas de tinción diferencial de microbiología, que fue presentado por el bacteriólogo danésmás utilizado Hans Christian Gram en 1884. Esta prueba diferenciará a las bacterias en bacterias Gram positivas y negativas Gram, lo que ayuda en la clasificación y diferenciación de microorganismos.

principio

bacterias tinción de Gram se diferencia de las propiedades químicas y físicas de sus paredes celulares mediante la detección de peptidoglicano, que está presente en una capa gruesa de bacterias gram-positivas. En un ensayo de tinción de Gram, bacterias Gram-positivas retienen el colorante cristal violeta, mientras que una tinción de contraste (comúnmente safranina o fucsina) añadido después de la violeta cristal da toda Gram-negativo rojo o rosa Gram coloring.The casi siempre el primer paso para la identificación de un organismo bacteriano. Mientras que la tinción de Gram es una valiosa herramienta de diagnóstico tanto en contextos clínicos y de investigación, no todas las bacterias pueden ser clasificado definitivamente por esta técnica. Esto resulta en grupos de variables de Gram y Gram-indeterminado bien.

Las bacterias Gram-indeterminado

Gram-indefinida no responden predecible a la tinción de Gram, y, en consecuencia, no se puede determinar ya sea como gram-positivos o Gram-negativos. Ellos tienden a manchar de forma desigual, que aparece en la parte positiva y Gram negativas Gram parcialmente, o no coloreada por un cristal violeta o safranina. Colorear culturas mayores (más de 48 horas) puede dar lugar a resultados falsos Gram variable, probablemente debido a los cambios en la pared celular con el envejecimiento. Gram-indeterminado son de color usando técnicas de tinción ácido-alcohol resistentes. Los ejemplos incluyen muchas especies de Mycobacterium, incluido el M. tuberculosis y M. leprae.

reactivos:

  • violeta de cristal, la mancha primaria
  • El yodo, el mordiente
  • Un blanqueador en acetona y alcohol (95%)
  • Safranina, la contratinción

procedimiento:

  • Tome un portaobjetos limpio libre de grasa,.
  • Preparar la mancha suspensión en el portaobjetos de vidrio limpio con una muestra de un bucle.
  • Aire seco y corrección de calor
  • Verter cristal violeta y mantenerlo durante unos 30 segundos a 1 minuto y enjuague con agua.
  • Inundar gramo de yodo durante 1 minuto y enjuague con agua.
  • A continuación, lavar con 95% de alcohol o acetona durante unos 10-20 segundos y enjuague con agua.
  • Añadir safranina durante aproximadamente 1 minuto y enjuague con agua.
  • aire seco, seco y observar al microscopio.

Espero que les guste

con amor

-Dixy


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